000064428 001__ 64428 000064428 005__ 20190122133111.0 000064428 037__ $$aTESIS-2018-006 000064428 041__ $$aspa 000064428 080__ $$a543 000064428 1001_ $$aMendiara Negredo, Isabel 000064428 24500 $$aDesarrollo de métodos analíticos para el análisis de precursores de colesterol, fitoesteroles e hidroxiesteroles de interés biológico en el estudio del metabolismo del colesterol 000064428 260__ $$aZaragoza$$bUniversidad de Zaragoza, Prensas de la Universidad$$c2014 000064428 300__ $$a326 000064428 4900_ $$aTesis de la Universidad de Zaragoza$$v2018-006$$x2254-7606 000064428 502__ $$aTesis-Univ. Zaragoza, Química Analítica, 2014$$bZaragoza, Universidad de Zaragoza$$c2017 000064428 506__ $$aall-rights-reserved 000064428 500__ $$aPresentado: 12.12.2014 000064428 520__ $$aLa determinación de esteroles en matrices biológicas supone un reto analítico importante ya que son compuestos que se encuentran a baja concentración respecto al colesterol tanto en los tejidos como en los fluidos estudiados (hígado, suero y plasma, respectivamente); lo que siempre va a suponer una interferencia en el análisis. Por otro lado, estos analitos son compuestos poco volátiles, por lo que tradicionalmente han sido determinados mediante cromatografía de gases. Esto suponía alargar el proceso de tratamiento de muestra para transformarlos en sus formas volátiles. Con la introducción de la cromatografía de líquidos acoplada a espectrometría de masas se abrió la posibilidad de analizar estos compuestos en su forma nativa, lo que facilitó el análisis y el tratamiento de muestra. El objetivo de esta Tesis fue desarrollar métodos rápidos y automatizados utilizando la cromatografía de líquidos acoplada a la espectrometría de masas, para determinar esteroles en matrices biológicas (hígado, suero y plasma) con el fin de profundizar en el estudio de enfermedades relacionadas con las alteraciones del metabolismo del colesterol. Para ello, se estudiaron alternativas a la reacción de hidrólisis alcalina (frecuentemente llevada a cabo en el tratamiento de muestra para la determinación de esteroles) realizándola con la asistencia de los ultrasonidos. También se desarrolló un método alternativo a la hidrólisis alcalina realizando una hidrólisis enzimática utilizando diversas esterasas. Posteriormente, se desarrolló un sistema online de tratamiento de muestra; automatizando así el proceso de limpieza previo a la introducción en el cromatógrafo gracias a la integración del cartucho de extracción en fase sólida en el mismo sistema cromatográfico. Por último, se buscaron nuevos compuestos marcadores de enfermedades relacionadas con el metabolismo del colesterol gracias al empleo de un cromatógrafo de líquidos acoplado a un espectrómetro de masas con analizador tiempo de vuelo. Para todos los métodos desarrollados se determinaron sus características analíticas comprobando su adecuación para determinar este tipo de analitos en muestras biológicas. 000064428 6531_ $$aQuímica analítica 000064428 6531_ $$aEspectroscopio de masas 000064428 6531_ $$aAnálisis cromatográfico 000064428 6531_ $$aAnálisis bioquímico 000064428 700__ $$aNerín de la Puerta, Cristina$$edir. 000064428 700__ $$aDomeño Recalde, Celia$$edir. 000064428 7102_ $$aUniversidad de Zaragoza$$bQuímica Analítica 000064428 8560_ $$fchperez@unizar.es 000064428 8564_ $$s7421792$$uhttps://zaguan.unizar.es/record/64428/files/Tesis.pdf 000064428 909CO $$ooai:zaguan.unizar.es:64428$$pdriver 000064428 909co $$ptesis 000064428 9102_ $$aQuímica Analítica$$bQuímica Analítica 000064428 980__ $$aTESIS